目前乙型肝炎病毒感染主要有免疫学方法和分子生物学诊断方法。分子生物学方法主要进行HBVDNA的方法的检测包括普通PCR、荧光定量PCR以及套式PCR。临床常已造成酶联免疫吸附实验假阴性的原因主要在于溶血、脂血、黄疸钩状效应引起的。另外试剂的选择同样重要，需要选择正规厂家生产的检验合格产品并严格按照说明书进行检验操作。
作者：浩然
来源：医学界感染频道
乙型肝炎病毒是一种DNA病毒，属于嗜肝DNA病毒科，该科病毒以RNA中间体为模板经反转录合成DNA链。在电镜下观察，HBV感染者血清中存在三种形式的颗粒：Dane颗粒、小球形颗粒、丝状或核状颗粒。一般情况下，血清中小球形颗粒最多而Dane颗粒最少。
常用检测方法：
在我国有50%~70%的人受过感染，由于乙型肝炎病毒疫苗的广泛使用，乙肝表面抗原携带率约占总人口的7.18%，属于中度流行国家。目前乙型肝炎病毒感染主要有免疫学方法和分子生物学诊断方法。
其中免疫学方法临床上常用的有酶联免疫吸附法（ELISA），固相放射免疫法、胶体金免疫层析法、时间分辨免疫荧光法、微粒子酶免疫分析法、化学发光法及电化学发光法（ECLIA）等。
分子生物学方法主要进行HBV DNA的方法的检测包括普通PCR、荧光定量PCR以及套式PCR。本文着重对免疫学方法中的酶联免疫吸附法（ELISA）以及荧光定量PCR法这两种常用HBV临床诊断方法进行介绍。
图1：电镜下的乙肝病毒
两种常用检测方法分析：
（1）酶联免疫吸附法（ELISA）
Elisa法是临床上进行免疫学检测乙肝病毒感染的常见方法，且通常是以检测血液中的HBsAg为诊断指标。
优点：方法具有灵敏度高、特异度强、重复性好的特点，且操作简单、试剂价廉、无放射性危害。
缺点：ELISA不能进行定量分析，在阳性判断值周围一定范围之外的测定结果为测定的灰区，易引起假阴性。
临床常已造成酶联免疫吸附实验假阴性的原因主要在于溶血、脂血、黄疸钩状效应引起的。另外试剂的选择同样重要，需要选择正规厂家生产的检验合格产品并严格按照说明书进行检验操作。
（2）荧光定量PCR法
HBV病毒核酸（HBV-DNA）水平是直接反映HBV患者病毒复制水平，病毒血症程度，传染性强弱的最佳指标，目前临床上常采用荧光定量PCR可直接检测血清中HBV-DNA的载量。
荧光定量PCR是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针，对PCR产物进行标记跟踪，实时在线监控反应过程，结合相应的软件可以对产物进行分析，计算待测样品模板的初始浓度。
优点：荧光定量PCR法诊断乙型肝炎病毒感染技术术具有快速、特异性、灵敏度高等特点，因此，可以对乙型肝炎病毒感染进行早期诊断、乙型肝炎病毒感染的流行病学调查、检测耐药基因等，为临床对乙型肝炎的诊断治疗、疗效观察及预后评估等提供科学依据。
缺点：1：对人员及工作环境均有较高要求，所需的设备、试剂等成本也较高，分子诊断技术要像免疫学指标检测那样普及有一定难度。
2：分子诊断学起步较晚，虽然发展较快，但许多理论和技术方面的问题有待于进一步的探明、提高和完善。
检测前患者有什么需要注意的？
1、在做乙肝两对半前应注意不要喝酒。
2、如果在检查前还在服用某些药物，那么最好是在检查前的一两天就停止用药，以免影响检查。
3、在做乙肝两对半检查前，还注意保证充足的休息，因为睡眠不好、劳累等有可能影响检查结果的准确性。
4、在检查前天晚上最好不要吃油腻、辛辣的食物。
5、乙肝两对半检查前是不需要空腹的，不过如果还需要检查肝功能、血脂等项目的话，就另当别论了。
做完了检测，检验结果怎么看呢？
一般的乙肝两对半检验有五项指标，分别为：乙肝表面抗原（HBsAg）、乙肝表面抗体（抗-HBs）、乙肝E抗原（HBeAg）、乙肝E抗体（抗-HBe）、乙肝核心抗体（抗-HBc）。那么这么多抗原抗体代表啥呢？
这五项指标结果组合起来是什么意思？
参考文献：
1：吕建新。分子诊断学在检验医学中的应用前景［J］。中华检验杂志，2005，28( 2) ：137-139。
2：郭辉。化学发光免疫分析法与酶联免疫法测定乙肝病毒标志物的
相关性分析[J]．中国伤残医学，2013，21(5): 270-272。
3：程正江，付文荣，曾平凡。荧光定量聚合酶链反应直接检测血清中乙型肝炎病毒核酸方法的建立及评价［J］．中华检验医学杂志，2004，27( 2) : 102-103。
